多肽合成

公司采用高效液相色谱系统，利用反向C18填料的制备柱，进行分离纯化。
分以下几个步骤：
1）鉴别：取少量多肽粗品，送质谱确认是否含有目标多肽（是，经过分析色谱确认其目标多肽在C18柱的保留时间，即出峰时间；否，重新合成多肽粗品）
2）溶解：使用超声波辅助溶解，一般选择90%水+10%乙腈（甲醇或异丙醇）。难溶，根据多肽序列中酸碱氨基酸的比例，碱性氨基酸比例大，则选择加入适当醋酸或三氟乙酸助溶；酸性氨基酸比例大，则选择加入适当氨水助溶。不溶，疏水性氨基酸比例大，则选择加DMSO（二甲基亚砜）。
3）过滤：将溶解好的粗品液体，通过0.45微米的滤膜过滤（目的保护制备柱）后，待用。
4）上样：利用高效液相制备系统，将液体样品输入制备柱中。
5）洗脱：根据1）得出洗脱梯度，利用不同长度多肽极性强弱差异，分离多肽中的杂质片段。
使用高效液相色谱系统的优点：分辨率高于其他色谱法；所使用的C18制备柱，具有柱效高，使用寿命长，重现性好，可以反复使用；速度快，效率高，每个样品可以在十几分钟或几十分钟内完成纯化；反相色谱应用广泛，技术方面也比较成熟，几乎对各种类型的有机化合物都具有良好的选择性。